基于斑马鱼模型和分子对接技术的心可舒片促血管生成活性成分研究

摘要：

目的 基于斑马鱼模型和分子对接技术研究心可舒片的促血管生成活性成分.方法 以人脐静脉内皮细胞HUVECs为模型,采用CCK-8与EdU-488细胞增殖检测试剂盒检测细胞活性与增殖能力,采用划痕实验与Transwell实验评价细胞迁移能力,采用成管实验检测各组细胞成管腔能力,评价心可舒片对HUVECs的促血管生成活性.以斑马鱼为模型,采用血管内皮细胞生长因子受体抑制剂PTK787建立斑马鱼节间血管损伤模型,根据各组节间血管长度,评价心可舒片对斑马鱼的促血管生成活性.心可舒片29个成分与表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、血管内皮生长因子受体1(vascular endothelial growth factor receptor 1,VEGFR1)、蛋白激酶 B(protein kinase B,AKT)和 VEGFR2的7个晶体结构进行分子对接,通过打分值与对接能筛选潜在活性成分,采用斑马鱼模型评价潜在活性成分的促血管生成活性.结果 心可舒片可显著提高细胞增殖能力(P＜0.001),提高细胞迁移能力及成管能力(P＜0.05、0.001),恢复PTK787造成的斑马鱼节间血管损伤(P＜0.01、0.001);通过分子对接共得到12个心可舒片潜在活性成分,斑马鱼验证结果表明丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸D、葛根素、3'-甲氧基葛根素、3'-羟基葛根素、大豆苷、紫草酸、迷迭香酸和考迈斯托醇可显著恢复PTK787诱导的斑马鱼节间血管损伤(P＜0.05、0.01、0.001).结论 采用分子对接技术与斑马鱼模型从心可舒片中筛选得到10个具有促血管生成作用的活性成分.

关键词：心可舒片、促血管生成、人脐静脉内皮细胞、斑马鱼、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸D、葛根素、3’-甲氧基葛根素、3’-羟基葛根素、大豆苷、紫草酸、迷迭香酸、考迈斯托醇

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分类号：R285.5(中药学)

资助基金：山东省自然科学基金青年项目;山东省重点研发计划;国家重点研发计划;齐鲁工业大学山东省科学院科教产融合创新试点工程项目;齐鲁工业大学山东省科学院生物及生物化学ESI培育学科开放课题

在线出版日期：2022-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共16页

页码：1418-1433