补肾通络方通过抑制chemerin及炎性因子干预骨质疏松症的机制研究

摘要：

目的 评价补肾通络方对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨、成脂分化以及小鼠单核巨噬细胞RAW264.7破骨分化模型的干预作用,并探究其调节骨形成及骨吸收的相关机制.方法 分别给予补肾方、通络方和补肾通络方进行干预,采用茜素红染色法鉴定BMSCs成骨分化后各组钙结节形成情况;采用油红O染色鉴定BMSCs成脂分化后各组脂滴形成情况;采用qRT-PCR法检测BMSCs成骨、成脂分化后各组成骨、成脂分化标志基因mRNA表达,成骨、成脂分化过程和炎症模型中chemerin mRNA表达;采用ELISA法检测BMSCs成骨、成脂分化过程和炎症模型中各组chemerin分泌量.采用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant alkaline phosphatase,TRAP)染色鉴定各组RAW264.7细胞破骨分化程度,并测定各组TRAP活性;采用Western blotting法检测RAW264.7细胞破骨分化中各组TRAP蛋白表达情况;采用qRT-PCR法及ELISA法检测RAW264.7细胞破骨分化后各组chemerin、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)mRNA表达及分泌.结果 与对照组比较,补肾通络方组钙结节显著增多(P＜0.01),脂滴显著减少(P＜0.01),成骨分化标志基因表达显著升高(P＜0.01),成脂分化标志基因表达显著下降(P＜0.05),chemerin分泌及基因表达在成骨分化第3天及成脂分化第3、7天显著下降(P＜0.05、0.01).与对照组比较,BMSCs炎症模型chemerin分泌及基因表达显著升高(P＜0.01);与BMSCs炎症模型比较,补肾通络方组chemerin分泌及基因表达显著下降(P＜0.01).与对照组比较,RAW264.7细胞破骨分化中TRAP阳性细胞、活力、蛋白表达以及IL-6、TNF-α分泌与基因表达均显著升高(P＜0.05、0.01);与模型组比较,补肾通络方组TRAP阳性细胞、活力、蛋白表达以及IL-6、TNF-α分泌与基因表达显著降低(P＜0.01).结论 补肾通络方可通过抑制chemerin及炎症因子来调节成骨、成脂分化及破骨细胞分化,从而促进骨形成、抑制骨吸收、改善骨质疏松症.

关键词：骨质疏松症;chemerin;炎症因子;补肾通络方;骨髓间充质干细胞;RAW264.7细胞

所属期刊栏目：52

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;江苏省研究生科研与实践创新计划项目;国家重点研发计划

在线出版日期：2021-12-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：5899-5909