10.7501/j.issn.0253-2670.2020.19.022
竹节参β-香树素合成酶基因克隆及生物信息学分析
目的 克隆三萜皂苷代谢关键酶竹节参β-香树素合成酶(β-AS)基因,采用生物信息学分析其序列及其结构与功能,为竹节参合成及调控机制研究提供基础.方法 提取竹节参叶片RNA,扩增β-AS基因编码区序列,将序列连接至pMDTM 18-T载体进行克隆、测序,并利用生物信息学分析比较移栽品和栽培品竹节参β-AS蛋白的特征,构建竹节参β-AS蛋白的系统进化树.结果 克隆出移栽品和栽培品竹节参的β-AS基因编码区序列,开放阅读框(ORF)均为2 286 bp,编码761个氨基酸.2个品种β-AS蛋白在细胞中的基本结构和功能是一致的,但两者之间存在8个氨基酸差异,使两者的蛋白质二级结构、三级结构磷酸化位点以及理化性质存在差异,可能会导致两者的催化活性存在差异.结论 克隆得到野生移栽品和栽培品竹节参的β-AS基因,并对2个品种β-AS蛋白进行了生物信息学分析和比较,为今后研究该酶的结构特征、功能以及其与皂苷含量的相关性提供参考,也为竹节参合成生物学研究提供了生物基因元件.
竹节参、β-香树素合成酶基因、基因克隆、生物信息学分析、三萜皂苷
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R282.12(中药学)
国家自然科学基金资助项目81673675
2020-12-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
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