五味子PLR基因及其启动子的克隆与表达分析

摘要：

目的 从五味子中克隆木脂素生物合成途径松脂醇-落叶松脂素还原酶(Pinoresinol-lariciresinol reductases,PLR)基因及其启动子序列,并进行生物信息学与表达分析.方法 根据转录组PLR测序序列设计特异性引物,克隆ScPLR并进行生物信息学分析;采用TAIL-PCR对ScPLR启动子序列扩增,并进行序列分析;采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)分析果实不同发育时期ScPLR的表达.结果 ScPLR基因开放阅读框(ORF)全长837 bp,编码278个氨基酸;ScPLR蛋白相对分子质量31 419.85,理论等电点8.97;具有跨膜结构,无信号肽,为稳定性疏水蛋白,主要由α-螺旋和无规卷曲构成:亚细胞定位预测ScPLR主要定位于细胞质;系统进化显示ScPLR与蓖麻PLR亲缘关系较近.克隆到ScPLR基因启动子长994 bp,具有TATA-box、CAAT-box基本元件、光调控、生长素响应、厌氧诱导、防御和应激反应的多种调控元件;qRT-PCR结果显示ScPLR表达量呈现果实膨大期快速增加而进入着色期迅速降低的变化趋势.结论 获得了ScPLR基因及其启动子序列,ScPLR果实着色期之前高水平表达的趋势和木脂素的动态变化相一致,为进一步研究该基因功能及表达调控奠定了理论基础.

关键词：五味子、ScPLR、基因克隆、启动子克隆、表达分析

所属期刊栏目：51

分类号：R282.12(中药学)

资助基金：2018年全国中药资源普查项目1102-01042918001

在线出版日期：2020-10-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：4747-4754