悬钩子木多糖的分离纯化及免疫调节活性研究

摘要：

目的 从悬钩子木中分离纯化多糖,初步分析其结构特征并进行免疫调节活性研究.方法 采用热水浸提法提取悬钩子木粗多糖(Rubus sachalinensis polysaccharides,RSP),再经Cellulose DE-52纤维素离子交换柱、SephadexG-100凝胶柱色谱进行分离纯化;利用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)鉴定纯度并测定相对分子质量;采用气相色谱分析其单糖组成;采用红外光谱和核磁共振波谱对其结构进行初步分析;采用CCK-8法检测其对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;利用ELISA试剂盒测定其对白细胞介素-2 (IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)释放能力的影响.结果 从悬钩子木中分离纯化得到RSP1-1和RSP1-2 2种多糖,相对分子质量分别为13 227(多分散指数1.15)和9 343(多分散指数1.08);2种多糖均主要含阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其物质的量比分别是RSP1-1 (9.5∶7.0∶10.3∶18.6)和RSPl-2 (5.7∶11.1∶10.3∶14.2);红外光谱及核磁波共振波谱对其结构分析证明RSP1-1可能主要含有α-1,3-Ara、β-1,4-Gal、β-1,3-Glc、β-1,3-Man片段,RSP1-2可能主要含有β-1,4-Gal、β-1,3-Glc、β-1,3-Man片段.质量浓度在5～200μg/mL时,RSP1-1、RSPl-2和RSP2均可刺激小鼠脾淋巴细胞的增殖(P＜0.05),并且明显促进淋巴细胞分泌IFN-γ和TNF-α (P＜0.05),质量浓度为5 μg/mL时能促进淋巴细胞分泌IL-2 (P＜0.05).结论 RSP1-1和RSP1-2均为首次从悬钩子木中分离得到的天然来源的均一多糖.红外光谱及核磁共振波谱进一步表征了其纯度和结构特征.RSP1-1、RSP1-2和RSP2均能不同程度促进脾淋巴细胞的增殖,促进淋巴细胞分泌IL-2、IFN-γ和TNF-α,呈现一定的免疫调节活性.

关键词：蒙药、悬钩子木、特征图谱、天然多糖、分离纯化、单糖组成、免疫活性

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分类号：R931.6(生药学（天然药物学）)

资助基金：国家自然科学基金地区项目;内蒙古自治区研究生教育创新计划项目;自治区级大学生创新创业训练计划项目

在线出版日期：2020-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：5941-5949