氯化两面针碱对人食管癌Eca109细胞抑制作用及机制研究

摘要：

目的 探讨氯化两面针碱对人食管癌Ecal09细胞的抑制作用及其诱导凋亡的分子机制.方法 采用CCK-8法检测不同浓度的氯化两面针碱不同的干预时间对Ecal09细胞的增殖抑制率.依据CCK-8法的结果将实验设4组,各组氯化两面针碱的终浓度分别为0、5、10、15 μmol/L,药物作用时间为48 h.以AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞术检测凋亡率;以实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法检测Caspase-3、Caspase-9和Noxa的mRNA表达;采用Western blotting法检测cleaved Caspase-3、Bcl-2、p53和Noxa的蛋白表达水平.结果 氯化两面针碱对Ecal09细胞具有增殖抑制作用,一定范围内呈时间和浓度依赖性.流式细胞术结果显示,5 μmol/L的氯化两面针碱主要诱发早期凋亡(P＜0.01);10、15μmol/L的氯化两面针碱主要诱发的是晚期凋亡(P＜0.01).qRT-PCR结果显示,Caspase-3、Caspase-9和Noxa的mRNA表达均随氯化两面针碱的浓度增加而升高,其中10、15 μmol/L组升高比较显著.Western blotting法结果显示,cleaved Caspase-3、p53和Noxa的蛋白水平均随氯化两面针碱浓度的增加而升高(P＜0.01),但Noxa的升高在5μnol/L组不显著,在10、15 μmol/L组升高明显(P＜0.01);Bcl-2蛋白的表达随着氯化两面针碱浓度的升高而降低,10、15 μmol/L组较为显著(P＜0.05、0.01).结论 氯化两面针碱对Eca109细胞的增殖抑制作用主要是通过诱导凋亡实现的,氯化两面针碱诱导Eca109细胞的凋亡与p53和Noxa的表达升高和Bc1-2的下调以及Caspase-3的活化有关.

关键词：氯化两面针碱、Eca109细胞、cleaved Caspase-3、Bcl-2、p53、Noxa

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分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81373633;浙江省自然科学基金资助项目LY18H270014

在线出版日期：2019-12-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：4969-4973