交联纳米SiO2固定化蜗牛酶的制备表征及转化淫羊藿苷研究

摘要：

目的 制备交联纳米SiO2固定化蜗牛酶,并对其理化性质、酶解淫羊藿苷为宝藿苷Ⅰ的最适酶解条件及酶学性能进行考察.方法 采用共价偶联法将蜗牛酶固定在戊二醛交联纳米SiO2上,以相对酶活力为指标,对固定化条件进行优化;采用透射电镜(TEM)、傅里叶红外光谱(FTIR)和元素分析法对固定化蜗牛酶的理化性质进行表征;并以淫羊藿苷为底物,以游离酶为对照,考察固定化蜗牛酶的最适酶解条件及酶解动力学参数、重复利用性、热稳定性等酶学性能.结果 固定化蜗牛酶制备的最佳酶载比为1:3,固定化时间为6h;其转化淫羊藿苷的最适酶解条件为pH 5.0,转化温度60℃,酶与底物质量比1:2,转化时间12 h.固定化蜗牛酶的酶解动力学参数最大反应速率(Vmax)为0.43 μg/min,米氏常数(Km)为0.78 mmol/L,重复使用5次后的相对酶活仍能保持在70％以上.结论 制备的交联纳米SiO2固定化蜗牛酶机械强度高、稳定性好,不但可重复使用,还可定向水解淫羊藿苷为活性更强的宝藿苷Ⅰ,工艺简单易行,转化效率高,适宜于工业化生产.

关键词：固定化蜗牛酶、交联纳米SiO2、生物转化、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅰ

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分类号：R283.6(中药学)

资助基金：国家自然科学基金青年基金项目81703714;江苏省科教强卫医学重点人才项目ZDRCA2016036

在线出版日期：2019-12-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：4904-4910