阳春砂萜类合酶AvTPS1启动子的克隆及其活性分析

摘要：

目的 获得药用植物阳春砂Amomum villousm的萜类合酶基因AvTPS1的启动子并进行活性分析.方法 从阳春砂叶片基因组DNA (gDNA)中克隆获得AvTPS1基因,再通过FPNI-PCR的方法从阳春砂叶片gDNA中克隆AvTPS1的启动子并进行序列分析,构建由该启动子驱动β-葡萄糖苷酸酶基因(GUS)的重组表达载体pCAM-AvTPS1p,利用农杆菌介导法注射侵染烟草Nicotiana benthamiana叶片进行瞬时表达来验证AvTPS1启动子的活性.结果 获得AvTPS1的gDNA序列长度为2 444 bp,经过序列比对发现AvTPS1含有7个外显子和6个内含子;通过FPNI-PCR成功获得568bp的AvTPS1启动子序列,其含有10种顺式作用元件,包括保守元件TATA-box和CAAT-box,以及可被转录因子MYC结合的G-box等;通过GUS染色发现AvTPS1启动子启动了GUS基因的表达,使转基因烟草叶片呈现蓝色.结论 AvTPS1启动子被成功克隆,且通过实验验证其具有启动基因表达的功能,为进一步研究AvTPS1在萜类合成途径的功能及其受转录因子调节的机制奠定了基础.

关键词：AvTPS1、启动子、阳春砂、瞬时表达、FPNI-PCR

所属期刊栏目：50

分类号：R282.12(中药学)

资助基金：国家自然科学基金青年基金项目81303163;广东省高等学校优秀青年教师培养计划Yq2013042

在线出版日期：2019-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2181-2187