药用贝母属系统发育关系分析及多重实时荧光PCR检测方法的建立

摘要：

目的 探讨多重实时荧光PCR检测方法对川贝母及伪品鉴别的可行性.方法 通过对常见贝母属植物的ITS、psbA-trnH、rbcL和matK基因序列种间变异、遗传距离及系统发育关系分析,选择进化速率快、种间变异大、种内变异小的基因作为靶基因,设计川贝母及伪品贝母的特异性引物和Taqman探针,建立一种多重实时荧光PCR检测方法.通过特异性、灵敏度及混合样本检测与测序方法比较进行方法评估.结果 贝母属ITS和psbA-trnH 变异位点高于rbcL和matK,通过遗传距离分析rbcL和matK基因显著低于ITS和psbA-trnH基因,以ITS作为靶基因,建立多重实时荧光PCR检测方法特异性强,灵敏度达0.01 ng,对18份样本抽查检出4份伪品贝母,检测结果与构建的NJ树聚类分析结果完全一致.结论 基于ITS区域序列为靶基因建立多重实时荧光PCR检测方法能够成功鉴定川贝母及其混伪品,为川贝母真伪鉴别提供依据.

关键词：ITS、psbA-trnH、rbcL、matK、多重实时荧光PCR、川贝母、混伪品

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分类号：R282.12(中药学)

资助基金：山东省创新公共服务平台:中药分子鉴定公共服务平台2018JGX111;山东省农业科学院农业科技创新工程:山东道地药材产业关键技术创新与应用CXGC2018D3;山东省高等学校对接产业类协同创新中心:中药质量控制与全产业链建设协同创新中心;山东省重点研发计划:30种柴胡SNP指纹图谱芯片的开发及利用2018GSF11902

在线出版日期：2019-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：2172-2180