川芎咖啡酸-3-O-甲基转移酶的同源建模和定点突变

摘要：

目的 构建川芎咖啡酸-3-O-甲基转移酶(Ligusticum chuanxiong caffeic acid-3-O-methyltransferase,LCCOMT)的三维模型,并利用定点突变对模型进行验证.方法 利用同源建模构建LCCOMT的初始三维模型;对初始三维模型进行动力学优化;将优化后的模型对接咖啡酸,预测LCCOMT的活性位点;对预测的活性位点展开定点突变,检测突变型蛋白的生物活性.结果 LCCOMT的三维模型能够与咖啡酸成功对接,His268残基可能是LCCOMT的活性位点,推测其能够与咖啡酸3-OH形成氢键.H268N与H268Q 2种突变酶分别丧失94.85％和95.28％的催促活性.结论 同源建模能够准确预测LCCOMT的三维模型.His268为LCCOMT的关键氨基酸残基,其作用可能是作为共轭碱,参与咖啡酸3-OH的去质子化反应.

关键词：川芎、阿魏酸、咖啡酸-3-O-甲基转移酶、同源建模、定点突变

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分类号：R282.12(中药学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31371232,31500276;成都市科技技术研发项目2015-HM01-00051-SF;国家级大学生创新创业训练计划资助项目201510613063

在线出版日期：2016-12-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：3677-3682