当归DXR基因保守区克隆和组织特异性表达分析

摘要：

目的 克隆当归Angelica sinensis1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(DXR)编码基因部分保守区序列,分析DXR基因在当归根、茎、叶中的特异性表达.方法 根据己克隆的植物DXR保守序列设计一对简并引物,以当归叶片总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增出DXR片段并连接到pGEM-T Easy载体上,转化大肠杆菌菌株Escherichia coli DH5α,阳性克隆经PCR检测后测序.运用RT-qPCR方法,以当归肌动蛋白基因Actin为内参基因,检测DXR在当归不同组织中的表达量.结果 得到一段564 bp的DXR基因序列,并在GenBank注册(登录号:KJ000259).序列分析表明,该片段编码187个氨基酸,与GenBank中注册的海岛棉Gossypium barbadense等6个物种的DXR核苷酸序列同源性和氨基酸序列同源性均在80％以上;DXR在叶中表达量最高,相对表达量分别是茎和根组织中的2.5倍和3.2倍(P＜0.01).结论 本研究首次从当归中克隆出了DXR部分保守区序列,并揭示了DXR在不同组织中的差异表达,为有效利用该基因奠定前期工作基础.

关键词：当归、1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶、克隆、肌动蛋白、RT-PCR

所属期刊栏目：45

分类号：R282.12(中药学)

在线出版日期：2014-08-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1907-1913