绿原酸人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

摘要：

目的 合成绿原酸(chlorogenic acid,CHA)人工抗原,制备CHA多克隆抗体,为制备过敏成分分析的免疫芯片奠定基础.方法 采用碳二亚胺法分别合成CHA免疫抗原(CHA-牛血清白蛋白)和包被抗原(CHA-卵清蛋白);UV法和TLC法鉴定人工抗原偶联是否成功;间接ELISA方法检测免疫小鼠血清中抗体效价;间接竞争ELISA方法检测抗体特异性.结果 经UV法和TLC法检测,CHA与BSA偶联成功.血清抗体效价为1:128 000,CHA-PAbs的质量浓度与抑制率的线性方程为Y=-0.10 lnX+ 1.158,线性检测范围为15.6～250 ng/mL,R2=0.995,并且和甘草酸、黄芩苷等与其常配伍应用的中药化合物均无交叉反应.结论 成功制备了灵敏度高、特应性好的CHA多克隆抗体,为CHA的微量检测和过敏性研究提供了实验依据.

关键词：绿原酸、人工抗原、多克隆抗体、碳二亚胺法、免疫分析

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分类号：R284.3(中药学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81274043,81373542;"重大新药创制"国家专项课题2010ZX09502-002

在线出版日期：2014-04-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：480-484