刺五加液泡膜内在蛋白基因的克隆与表达分析

摘要：

目的 克隆刺五加的液泡膜内在蛋白(tonoplast intrinsic proteins,TIP)基因,并对其进行生物信息学和表达分析.方法 采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆刺五加TIP基因cDNA的全长序列.以GAPDH为内参照基因,通过RT-PCR法检测TIP基因在不同生长发育时期和器官中的表达情况.结果 刺五加TIP基因cDNA的全长1 080 bp,开放阅读框长756 bp,编码251个氨基酸的蛋白,该蛋白包含TIP家族的标志性序列.刺五加的TIP蛋白具有6个跨膜螺旋,定位于液泡膜.表达分析结果显示,刺五加TIP基因在不同生长发育时期和不同器官中均有表达,但表达量具有显著差异(P＜0.05).其中盛花期的表达量最高,是最低量果实快速生长期的2.07倍;各器官中,叶片的表达量最高,是最低量根的1.73倍.结论 首次分离到刺五加TIP基因的cDNA全长序列,并证实其在盛花期的叶中表达量最高,为进一步研究TIP基因对刺五加水分代谢的影响奠定基础.

关键词：刺五加、液泡膜内在蛋白、克隆、生物信息学、表达分析

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分类号：R282.12(中药学)

资助基金：河北省自然科学基金——石药集团医药联合研究基金项目H2012401006;河北联合大学培育基金GP201306

在线出版日期：2014-03-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：250-254