小檗碱的酶反应动力学及其代谢酶表型和代谢产物研究

摘要：

目的 采用混合人肝微粒体和重组人源细胞色素酶P450 (CYP)同工酶,研究小檗碱的代谢特性,明确参与小檗碱代谢的CYP酶亚型及其贡献度,并确证相关代谢产物的结构.方法 将混合人肝微粒体分别与20、100、200、400、600、800、1 200 ng/mL的小檗碱共同孵育后,计算小檗碱酶反应动力学米氏常数(Km)、最大反应速率(Vmax)、体外肝微粒体对药物的固有清除率(CLint);采用CYP酶的特异性抑制剂研究小檗碱的代谢表型;将重组人源CYP同工酶CYP3A4、CYP1A2、CYP2D6、CYP2C9与一定质量浓度的小檗碱孵育,UPLC法测定孵育液中原形药物的剩余量和代谢产物的生成量;整体归一化法计算各酶的代谢贡献度;LC-MS/MS法鉴定相关代谢产物.结果 小檗碱在混合人肝微粒体中的Vmax为1.51nmol·mg-1·h-1;Km为2.69 nmol/mL; CLint为0.56 mL·mg-1·h-1.CYP2D6的特异性抑制剂奎尼丁和CYP1A2的特异性抑制剂呋喃茶碱对小檗碱的代谢有显著抑制作用,其他CYP酶抑制剂对小檗碱的代谢无显著影响.CYP2D6、CYP1A2对小檗碱代谢产物M1(去亚甲基小檗碱)的贡献度分别为75.253 9％、23.323 6％;对M2产物(唐松草分定或小檗红碱)的贡献度分别为46.893 8％、8.679 5％.小檗碱在体外混合人肝微粒体温孵体系中的主要代谢途径为O-去甲基化,可生成去亚甲基小檗碱和唐松草分定或小檗红碱.结论 小檗碱在肝脏中主要被CYP2D6和CYP1 A2代谢,分别生成去亚甲基小檗碱、唐松草分定或小檗红碱.

关键词：小檗碱、混合人肝微粒体、重组人源细胞色素P450同工酶、代谢产物、去亚甲基小檗碱、唐松草分定、小檗红碱

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分类号：R969.1(药理学)

资助基金：国家重大新药创制专项2009ZX09103-312,2011ZX09102-011-08

在线出版日期：2014-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：3334-3340