刺五加肌动蛋白基因的克隆和表达稳定性分析

摘要：

目的 克隆刺五加Eleutherococcus senticosus的肌动蛋白(actin,ACT)基因并使其成为可用的内参基因.方法 运用RT-PCR法克隆ACT基因的部分序列,并以其为内参基因进行半定量PCR和real-time PCR分析.结果 克隆了长度为1 031bp的刺五加ACT基因,推测其编码343个氨基酸,与光皮桦Betula luminifera、陆地棉Gossypium hirsutum、茶树Camellia sinensis的ACT氨基酸序列同源性分别为99.42％、98.83％、98.54％.刺五加ACT基因在不同器官和不同生长发育时期的表达量基本恒定,以其为内参基因的半定量PCR和real-time PCR均具有良好的扩增效果和重现性.结论 首次分离并报道了刺五加ACT的cDNA克隆,证实该序列可以作为基因表达分析的内参基因,建立了其real-time PCR反应体系.

关键词：刺五加、肌动蛋白基因、实时定量PCR、表达稳定性、cDNA克隆

所属期刊栏目：44

分类号：R282.12(中药学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30701086;河北省自然科学基金资助项目C2009001252;河北省自然科学基金-石药集团医药联合研究基金项目H2012401006

在线出版日期：2013-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1819-1822