重组天花粉蛋白体外诱导宫颈癌HeLa细胞p27基因去甲基化的研究

摘要：

目的 研究重组天花粉蛋白(recombinant trichosanthin,rTCS)对宫颈癌HeLa细胞中p27基因甲基化状态和基因表达的影响.方法 应用不同质量浓度的rTCS(20、40、80μg/mL)处理体外培养的宫颈癌HeLa细胞后,MSP法检测用药前后细胞中p27基因的甲基化状态,Real-Time PCR法检测用药前后细胞中p27和DNA甲基转移酶1(DNMT1)mRNA水平的变化,Western-blotting法检测用药前后细胞中p27蛋白表达的变化.结果 HeLa细胞中p27基因为低表达,基因启动子区CpG岛呈部分甲基化状态.40μg/mL rTCS处理导致p27基因启动子区CpG岛去甲基化;在20、40、80μg/mL的rTCS作用48 h后,p27基因mRNA相对表达水平分别升高2.22、4.00、6.03倍,p27蛋白水平表达也逐渐增加;宫颈癌HeLa细胞中DNMT1 mRNA高表达,40μg/mL rTCS处理48 h可至DNMT1 mRNA表达水平降低78%.结论 rTCS通过抑制DNMT1.逆转p27基因启动子区CpG岛的甲基化状态,使宫颈癌HeLa细胞中p27基因表达活化.rTCS能逆转宫颈癌HeLa细胞p27基因甲基化状态,调控p27基因和DNMT1的表达.

关键词：重组天花粉蛋白、p27基因、宫颈癌、DNA甲基化

所属期刊栏目：41

分类号：R286.91(中药学)

资助基金：国家自然科学基金30873282;湖北省自然科学基金2009CDA060

在线出版日期：2010-04-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：245-249