苦瓜籽MAP30的聚乙二醇化学修饰条件优化及纯化研究

摘要：

目的 探讨聚乙二醇修饰苦瓜籽核糖体失活蛋白(MAP30)的反应条件以及修饰产物的纯化方法.方法 在不同条件下,将聚乙二醇活性酯(mPEG)2-NHS与MAP30反应,用SDS-PAGE分析不同反应条件对产物成分的影响;采用Sephacryl S-300 HR分子筛柱色谱法对修饰产物进行分离纯化,TNBS法测定目标产物PEG-MAP30的氨基修饰度.结果 聚乙二醇修饰MAP30的最优反应条件为4℃,pH 8-5硼酸硼砂缓冲液,MAP30质量浓度1 mg/mL,MAP30与(mPEG)2-NHS质量比1:10为最佳修饰条件,5 min内反应完全;反应产物进一步纯化,经SDS-PAGE检测目标产物PEG-MAP30中不含未修饰的MAP30;TNBS法测定MAP30的氨基修饰度为44.9%.结论 初步确定了聚乙二醇修饰MAP30的反应条件和修饰产物的纯化方法.

关键词：苦瓜籽、核糖体失活蛋白(MAP30)、聚乙二醇、化学修饰

所属期刊栏目：39

分类号：R284.2;R286.02(中药学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目C01020404

在线出版日期：2009-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1640-1643