10.3321/j.issn:0253-2670.2008.11.015
苦瓜籽MAP30的聚乙二醇化学修饰条件优化及纯化研究
目的 探讨聚乙二醇修饰苦瓜籽核糖体失活蛋白(MAP30)的反应条件以及修饰产物的纯化方法.方法 在不同条件下,将聚乙二醇活性酯(mPEG)2-NHS与MAP30反应,用SDS-PAGE分析不同反应条件对产物成分的影响;采用Sephacryl S-300 HR分子筛柱色谱法对修饰产物进行分离纯化,TNBS法测定目标产物PEG-MAP30的氨基修饰度.结果 聚乙二醇修饰MAP30的最优反应条件为4℃,pH 8-5硼酸硼砂缓冲液,MAP30质量浓度1 mg/mL,MAP30与(mPEG)2-NHS质量比1:10为最佳修饰条件,5 min内反应完全;反应产物进一步纯化,经SDS-PAGE检测目标产物PEG-MAP30中不含未修饰的MAP30;TNBS法测定MAP30的氨基修饰度为44.9%.结论 初步确定了聚乙二醇修饰MAP30的反应条件和修饰产物的纯化方法.
苦瓜籽、核糖体失活蛋白(MAP30)、聚乙二醇、化学修饰
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R284.2;R286.02(中药学)
国家自然科学基金资助项目C01020404
2009-01-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
1640-1643