植物表达载体在三分三发根中的高效表达

摘要：

目的 建立基于发根培养的三分三Anisodus acutangulus遗传转化体系及在三分三发根中表达外源基因的方法.方法 由种子直接萌发得到无菌苗,建立了三分三的无菌苗培养系统.将植物高效表达载体pCAMBIA1304+导入经过"disarmed"改造的根癌农杆菌C58C1(携带pRiA4质粒),获得了携带外源基因表达载体的重组C58C1工程菌.取生长良好的幼嫩真叶作为外植体,在乙酰丁香酮的诱导下用重组C58C1进行感染,诱导发根.选取在无激素培养基上生长迅速,分支多的发根单克隆进行继代培养.经过3次继代培养,PCR(polymerase chain reaction,聚合酶链式反应)检测用于验证发根型质粒pRiA4和表达型质粒pCAMBIA1304+是否整合到三分三发根基因组内.结果 建立了基于发根培养的三分三遗传转化体系,发根诱导频率达到100%,PCR检测表明pRiA4和pCAMBIA1304+质粒共转化率达到32%.结论 该方法可以用于在三分三发根中高效表达外源基因,为实现基于发根的三分三产托品烷类生物碱的代谢工程奠定了基础.

关键词：三分三、发根、共转化

所属期刊栏目：38

分类号：R282.1(中药学)

资助基金：国家自然科学基金30500303

在线出版日期：2007-07-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：588-591