姜黄素促进肌腱干细胞的体外增殖及成骨分化

摘要：

目的:研究姜黄素对肌腱干细胞(tendon stem cells,TSCs)生物学行为的影响.方法:分离、培养大鼠TSCs,将不同浓度姜黄素溶液的完全培养基与TSCs共培养,通过CCK8法检测细胞增殖情况,确定姜黄素溶液的最适浓度;将TSCs与10μmol/L姜黄素共培养,0μmol/L姜黄素处理组作为对照组,通过碱性磷酸酶(alkaline phos?phatase,ALP)染色和活性检测评估其早期成骨分化水平;使用茜素红染色评估成骨分化晚期细胞外基质矿化情况;利用实时荧光定量逆转录PCR检测细胞成骨诱导14 d时成骨指标骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein 2,Bmp2)、核心结合因子α1(core binding factor alpha lα1,Runx2)、骨钙素(osteocalcin,Ocn)和Y染色体性别决定区-盒转录因子9(SRY-box transcription factor 9,Sox9)的表达;通过蛋白免疫印迹检测Runx2、Ocn和Sox9成骨相关基因的蛋白表达.结果:成功分离培养TSCs;CCK8结果显示含不同浓度姜黄素溶液的培养基中的TSCs均能持续增殖,但从20μmol/L姜黄素组开始,后续浓度姜黄素组的细胞增殖能力明显下降(P<0.01),后续选择10μmol/L姜黄素组作为实验浓度;ALP活性检测及染色结果显示姜黄素组细胞的ALP活性高于对照组(P<0.001);茜素红染色结果显示姜黄素组的细胞外基质矿化水平高于对照组;实时荧光定量逆转录PCR结果显示姜黄素组细胞的相关成骨基因Bmp2、Runx2、Ocn和Sox9的表达均高于对照组(P<0.05);蛋白免疫印迹结果表明Runx2、Ocn和Sox9成骨相关基因的蛋白表达均高于对照组(P<0.01).结论:姜黄素能够促进TSCs的体外增殖及成骨分化.

关键词：姜黄素、肌腱干细胞、骨肌腱接点、成骨分化

所属期刊栏目：42

分类号：R373.1+3;R735.7;R657.3

资助基金：上海市奉贤区脊柱伤病微创临床诊疗中心项目fxlczlzs-a-202103

在线出版日期：2023-05-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：131-136,后插1