miRNA-7过表达对食管癌细胞TE-1顺铂敏感性的影响及机制研究

摘要：

目的:探讨miRNA-7过表达对食管癌细胞TE-1顺铂敏感性的影响及其可能机制.方法:选择食管癌细胞株TE-1,采用Lipofectmin 2000瞬时转染TE-1细胞,转染对照组瞬时转染miRNA-7-Negative Control,转染组瞬时转染miRNA-7-mimic,未转染的食管癌细胞株TE-1为空白对照组.采用实时荧光PCR方法检测3组表皮生长因子受体(EGRF) mRNA、miRNA-7水平;分别采用Western blot法和CCK-8法检测转染组和转染对照组EGRF蛋白水平及对顺铂敏感性的变化.使用免疫荧光标记法,在聚焦显微镜下观察转染对照组及转染组EGFR分布情况.结果:转染对照组与空白对照组EGFR mRNA、及miRNA-7水平差异均无统计学意义(P＞0.05);转染组miRNA-7基因表达水平高于转染对照组与空白对照组(P＜0.05),转染组EGFR mRNA基因表达水平显著低于转染对照组与空白对照组(P＜0.05);在顺铂浓度为16.66、33.33、66.66 μmol/L时,转染对照组的细胞抑制率均高于转染组(P＜0.05);转染后48 h,转染对照组浆蛋白及核蛋白中EGFR的表达水平高于转染组(P＜0.05);转染对照组EGFR荧光定位主要分布在胞浆及胞膜中,细胞阳性率为100.0％;转染组主要表现为EGFR高表达,但是在胞浆及胞膜中表达水平降低,细胞核呈现出约95.0％的阳性.经Spearman秩相关分析结果提示,miRNA-7与EGFR表达之间呈负相关(r=-1.462,P＜0.05).结论:miRNA-7过表达会降低食管癌细胞TE-1对顺铂的敏感性,其机制可能与EGFR核转位增多有关.

关键词：食管癌细胞、TE-1、微小RNA-7、顺铂、表皮生长因子受体、耐药性

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资助基金：湖北省卫健委立项课题;湖北省教育厅项目

在线出版日期：2020-12-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：356-360,封4