结核杆菌H37Rv菌株蛋白Rv0117和Rv3379c的表达纯化及功能验证

摘要：

目的:表达纯化结核分枝杆菌H37Rv菌株Rv0117及Rv3379c蛋白,并验证其活化结核患者外周血中γδT细胞的功能.方法:提取H37Rv菌株中的基因组DNA,以此为模板通过PCR方法扩增Rv0117及Rv3379c基因.用限制性内切酶双切Rv0117及Rv3379c基因,连接到pET30载体上,转化到表达宿主大肠杆菌BL21中.用IPTG进行诱导表达,通过聚丙酰胺凝胶电泳和Western bolt鉴定重组表达蛋白.流式细胞术检测其活化结核患者外周血中γδT细胞的功能.结果:成功构建原核表达载体pET30a-Rv0117及PET30a-Rv3379c,并获得大量表达的Rv0117及Rv3379c蛋白,Western blot结果表明Rv0117及Rv3379c成功纯化,Rv0117及Rv3379c蛋白均能活化结核患者外周血中的γδT细胞.结论:Rv0117及Rv3379c蛋白的表达和纯化为开发基于γδT细胞的新型结核疫苗奠定基础.

关键词：结核杆菌、蛋白表达、γδT细胞

所属期刊栏目：35

分类号：R5 ;R37

资助基金：国家自然科学基金面上项目31370890

在线出版日期：2017-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：350-354