陇中损伤散提取物对成骨细胞增殖影响的血清药理学方法的建立及验证

摘要：

目的:建立并验证陇中损伤散提取物(extract of Longzhong sunshang powder,LSE)对成骨细胞增殖影响的血清药理学研究方法.方法:用LSE末次给药后颈总动脉采血制备含药血清,按照LSE不同给药剂量、给药时间、采血时间分组,分别用含不同浓度LSE的血清培养胎鼠成骨细胞(osteoblast,OB).采用MTT法检测细胞增殖能力,倒置相差显微镜观察OB形态,Von kossa染色法观察OB的矿化结节,以碱性磷酸酶活性、矿化结节数、基质钙含量、Ⅰ型胶原免疫组化等指标与空白对照组进行对比分析.结果:等剂量组(给药剂量),5d组(给药时间),1h组(采血时间)的OD值,与对照组比较有显著性差异(P＜0.05);不同浓度含药血清组的OD值:10％组＞15％组＞5％组,组间比较有显著性差异(P＜0.05);LSE可显著增加OB的碱性磷酸酶染色阳性细胞数、矿化结节数、基质钙含量(P＜0.01)以及上调Ⅰ型胶原表达(P＜0.05).结论:LSE以等剂量(1g/kg)灌胃给药5d,末次给药1h后采血制备血清,以10％浓度与OB细胞共培养,是促进胎鼠成骨细胞增殖的优选方案.

关键词：陇中损伤散、提取物、成骨细胞、增殖、血清药理学

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资助基金：甘肃省教育厅科研资助项目034B-04

在线出版日期：2015-09-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：241-245,249,封3