土拨鼠肝炎病毒转基因小鼠模型的建立

摘要：

目的:建立土拨鼠肝炎病毒(Woodchuck hepatitis virus,WHV)转基因小鼠模型,以用于嗜肝病毒感染的发病机制研究.方法:采用微注射技术将1.3-倍WHV基因[野生型和WHV S抗原(WHV surface antigen,WHsAg)缺陷型]注射人C57BL/6xC3H小鼠的胚胎,然后与C57BL/6小鼠回交,建立WHV转基因小鼠.肝内WHVDNA复制和mRNA表达水平分别采用Southern杂交和real-time RT-PCR检测,血清中WHV病毒载量采用real-timePCR检测,HE染色进行肝组织病理学检测,ELISA检测血清中WHV核心抗体,流式细胞仪检测WHV核心抗原(WHV core antigen,WHcAg)特异性细胞毒性T淋巴细胞.结果:成功建立野生型WHV转基因小鼠和WHsAg缺陷型转基因小鼠.WHsAg缺陷型小鼠肝内WHV复制水平显著高于野生型小鼠,野生型WHV转基因小鼠血清WHV载量104～108 copies/mL.而且雄性小鼠肝内和血清WHV复制水平显著高于雌性小鼠.16周龄以上的WHV转基因小鼠约半数血清可检测出高滴度的WHV核心抗体.而且少数转基因小鼠可以检测到WHcAg特异性细胞毒性T淋巴细胞.结论:这种新建的WHV转基因小鼠肝内可检测到病毒复制和mRNA表达,血清有高水平的WHV病毒载量,可以用于嗜肝病毒感染的发病机制、抗病毒治疗等研究.

关键词：土拨鼠肝炎病毒、转基因小鼠、复制、细胞免疫

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资助基金：湖北省自然科学基金2010CDZ036;太和医院博士启动基金2010QD13

在线出版日期：2014-11-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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