不同临床有效浓度异丙酚对新生大鼠海马区来源神经干细胞增殖分化和凋亡的影响

摘要：

目的:探讨不同临床有效浓度异丙酚对新生大鼠海马区来源神经干细胞增殖分化及凋亡的影响.方法:采用已建立的新生SD大鼠海马区来源神经干细胞单细胞克隆系细胞株,将其均匀地接种到24或48孔培养板中(含血清培养基培养孔用于分化和凋亡检测,无血清培养基培养孔用于增殖周期和凋亡检测).将细胞随机分为五组(每组5个培养孔):(1)低异丙酚浓度组(P1组):终浓度2.5μg/mL; (2)中异丙酚浓度组(P2组):终浓度5.0μg/mL;(3)高异丙酚浓度组(p3组):终浓度10.0 μg/mL;(4)C组:正常(control)对照组;(5)L组:脂肪乳(introlipid)对照组.培养8h后,5-溴脱氧尿(Brdu)检测细胞增殖周期,培养48 h后,流式细胞仪检测各组神经干细胞增殖分化过程中的增殖和凋亡情况;72h免疫荧光技术检测神经元特异性微管蛋白抗体(β-tubulin)和星形胶质细胞特异性胶质酸性蛋白(GFAP),观察神经干细胞分化的各类神经细胞形态学变化、分化比率及分化细胞的凋亡情况.结果:与C组比较,L组细胞增殖周期和分化比率无明显差异(P＞0.05),分化细胞无明显凋亡且细胞形态正常;P2和P3组细胞增殖周期显著抑制,增殖和分化过程中凋亡比率明显升高(其中P2组P＜0.05;P3组P＜0.01),分化细胞的突触或轴突发育差且发生大量凋亡,未凋亡的星形胶质细胞增生肥大;P1组神经元分化比率高(P＜0.05).结论:中高浓度异丙酚均明显抑制新生大鼠海马区来源神经干细胞的增殖和分化,并诱发神经细胞的大量凋亡,影响到分化细胞的神经突起分支、树突棘的生长发育;低浓度异丙酚能诱导神经干细胞向神经元细胞分化.

关键词：异丙酚、神经干细胞、增殖、分化、凋亡

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资助基金：湖北省自然科学基金项目2012FFC060;湖北医药学院博士研究生启动金项目2011QDZR-2

在线出版日期：2013-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：416-420,425,封4