Skp2基因沉默对大肠癌细胞SW480生物学特性的影响

摘要：

目的:观察Skp2基因沉默对人大肠癌SW480细胞增殖与凋亡的影响.方法:通过细菌内同源重组法,构建含有H1启动子驱动、表达绿色荧光蛋白(GFP)标志和Skp2基因干扰片段的腺病毒骨架载体.通过测序鉴定后在HEK293细胞中包装成腺病毒,并扩增纯化.体外感染人大肠癌SW480细胞,在荧光显微镜下观察GFP表达,以确定转染效率;用蛋白免疫印迹技术检测基因沉默效率.用MTT比色法检测细胞生长率,流式细胞技术检测细胞周期和凋亡.结果:琼脂糖电泳和测序鉴定表明针对Skp2基因干扰片断的碱基序列及插入位点完全正确;Skp2基因沉默后影响大肠癌SW480细胞的周期进程,使其发生G0/G1期阻滞,抑制了细胞的增殖,使其生长速度减缓;并促使大肠癌SW480细胞凋亡.结论:Skp2基因沉默后影响大肠癌SW480细胞的细胞周期,发生G0/G1期阻滞,抑制了细胞的增殖,并诱导细胞凋亡.

关键词：S期激酶相关蛋白2、RNA干扰、腺病毒载体、细胞增殖、细胞凋亡

所属期刊栏目：32

资助基金：湖北省教育厅科研项目200524001

在线出版日期：2013-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：363-366,376,封3