PEP-1-CAT抑制氧化应激条件下大鼠骨髓间充质干细胞的凋亡
目的:研究PEP-1-CAT融合蛋白转导人大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenehymal stem ceils,MSC)的能力,以及其预处理对MSC在氧化应激损伤条件下凋亡的影响及其机制.方法:采用流式细胞仪检测MSC表面标记物CD29、CD90、CD45、CD34,并检测成脂肪细胞和成骨细胞的诱导分化能力.采用免疫荧光染色和Western blot检测融合蛋白His-CAT和His-PEP-1-CAT转导入MSC的能力.DAPI染色和流式细胞仪检测细胞的凋亡率,采用相应的试剂盒分别检测丙二醛(MDA)含量、乳酸脱氢酶(LDH)活性的改变和线粒体膜电位的变化.结果:MSC低表达CD34(1.78%)、CD45(1.41%),高表达CD29 (94.3%)、CD90( 95.5%),具有成脂、成骨多向分化的潜能.PEP-1 -CAT转导人MSC中呈现时间和剂量依赖性特征,而His-CAT不能进入细胞内.与His-CAT组相比较,PEP-1-CAT融合蛋白预处理组MSC的凋亡率明显降低,LDH和MDA含量明显下降,减轻了因氧化应激引起的线粒体膜电位的下降.结论:PEP-1-CAT融合蛋白通过清除活性氧,维持线粒体膜电位的稳定,显著抑制了MSC在氧化应激损伤情况下的凋亡.
PEP-1肽、过氧化氢酶、骨髓间充质干细胞、氧化应激、细胞凋亡、线粒体膜电位
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R34(人体生物化学、分子生物学)
国家自然科学基金81170095;湖北省教育厅优秀中青年创新团队T200811
2013-01-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共8页
285-291,封3