携改良型HBVpre-S1基因表达载体的构建及表达
目的:构建携改良型HBVpre-S1基因表达载体.方法:以我国HBV流行株adr的DNA为模板,PCR法提取并扩增HBVpre-S1,用定点突变延伸法完成突变.将突变后的HBVpre-S1基因片段通过双酶切,转化到制备好的DH5a感受态细胞中,纯化、质粒测序后,用醋酸锂法转化酵母细胞AH109.表达产物进行SDS-PAGE电泳分析和Western免疫印迹检测.结果:成功扩增出HBV流行株adr的HBVpre-S1基因片段,成功完成HBVpre-S1基因的突变,重组质粒pGBKT7 -HBVpre-S1构建成功.Western免疫印迹分析,显示对照无表达,而转化了pGBKT7-HBVpr-S1的印迹分析可见明显目的基因蛋白条带且无杂带.结论:成功扩增出HBVpre-S1基因片段并构建出携改良型HBVpre-S1基因表达载体,并在酵母中融合表达成功.
HBVpre-S1、基因突变、真核表达载体、酵母细胞
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Q786(基因工程(遗传工程))
四川省卫生厅科技项目090210;泸州市科技局重点科技项目2009-S-16
2012-08-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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