RNA干扰抑制土拨鼠肝炎病毒X基因表达

摘要：

目的:研究土拨鼠肝炎病毒(WHY)序列特异性siRNA对WHVX基因表达的抑制作用.方法:以WHV全长质粒为模板PCR扩增WHVX基因,克隆到pXF3H载体构建WHX-HA融合蛋白真核表达质粒(pXF3HWHx)；合成siRNA的模板序列,克隆到siRNA表达质粒psiRNA构建shRNA表达质粒(psiWx1、psiWx2)；质粒pXF3 H-WHx与psiWx1、psiWx2共转染Hela细胞,Western blot检测WHV X蛋白的表达.结果:Hela细胞中WHVX蛋白的表达受siRNA的抑制,psiWx1表达的siRNA抑制90％以上的X蛋白表达,并呈剂量依赖性,但是WHV X基因靶位点中2个突变的核苷酸可使这种干扰作用消失.结论:质粒表达的siRNA序列特异性抑制WHV X蛋白的表达.

关键词：土拨鼠肝炎病毒、土拨鼠肝炎病毒X蛋白、RNA干扰、小干扰RNA

所属期刊栏目：30

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：湖北省科技厅自然科学基金重点项目2010CDZ036;湖北医药学院基金项目2009QDJ37

在线出版日期：2012-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：475-479