Skp2-siRNA构建及其对食管癌细胞Eca-109p27和Bcl-2蛋白表达的影响

摘要：

目的:研究siRNA抑制Skp2基因在食管癌细胞中表达,探讨Skp2在肿瘤发生过程中的作用.方法:在skp2基因编码区选择4个RNAi作用位点,体外合成前体DNA链,复性后连入逆转录病毒载体pSUPER-retro (pRS),转染包装细胞PT67,收集含病毒颗粒的培养上清感染食管癌Eca-109细胞,经嘌呤霉素筛选并扩大培养后形成稳定克隆.流式细胞仪检测细胞凋亡情况,RT-PCR和免疫印迹法检测Eca-109细胞内Skp2 mRNA、p27和Bcl-2表达.结果:与正常细胞和空载细胞相比,筛选得到的2个克隆细胞Skp2 mRNA表达水平下降(P<0.01),p27表达增高(P<0.05),Bcl-2表达降低(P<0.05),细胞凋亡增加(P<0.05).结论:skp2 siRNA促进食管癌细胞凋亡与p27上调有关.

关键词：Skp2、RNAi、食管癌、p27、Bcl-2

所属期刊栏目：30

分类号：R54(心脏、血管（循环系）疾病)

在线出版日期：2011-06-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：11-15