pET15b-YARA-EGFP原核表达质粒的构建及融合蛋白YARA-EGFP的表达与纯化

摘要：

目的:构建原核表达载体 pET15b-YARA-EGFP,并进行YARA-EGFP融合蛋白的表达和纯化.方法:用分子克隆技术构建出表达型载体 pET15b-YARA-EGFP,在E.coli BL21(DE3)中表达融合蛋白YARA-EGFP,并进行Ni2+-NTA树脂柱亲和层析以纯化蛋白.结果:经测序证实成功构建了表达型载体pET15b-YARA-EGFP,YARA-EGFP融合蛋白在E.coli BL21(DE3)中得到表达,纯化后的蛋白浓度为1.098 mg/mL.SDS-PAGE和Western blot分析表明纯化蛋白为目的蛋白YARA-EGFP.结论:已成功制备出YARA-EGFP融合蛋白.

关键词：细胞穿透肽、增强型绿色荧光蛋白、原核表达、融合蛋白

所属期刊栏目：28

分类号：Q753(分子遗传学)

资助基金：十堰市重大科技项目2006030Z;2008年度湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队计划T200811

在线出版日期：2009-06-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：116-119,124,封2