卡那霉素人工核糖开关构建和验证

摘要：

适体酶是一种常用的人工核糖开关,被广泛用于基因表达调控,目前报道最多且更加成熟的仍是抑制类型(OFF)的适体酶,激活类型(ON)的适体酶报道较少且效率不高,为获得更多激活类型的适体酶,设计并验证可响应卡那霉素调节的激活型适体酶.通过理性设计适体酶linker部分,使用适体酶控制表达卡那霉素抗性基因和荧光蛋白,在大肠杆菌中进行验证及评估.设计了7个不同linker的适体酶结构,在通过大肠杆菌平台进行验证时,其中4个无法在卡那霉素抗性平板上正常生长,3个结构能够正常生长,引入荧光蛋白评估这3个结构发现,这3个结构都能够响应卡那霉素的调节,其调控效率分别为1.93倍、2.99倍和1.43倍.本研究成功实现了在大肠杆菌中对抗生素类型适体酶的验证和评估,并且通过这一策略获得了3个激活类型,响应卡那霉素调节的适体酶结构.

关键词：适体酶、卡那霉素、大肠杆菌、验证和评估、激活型

所属期刊栏目：29

分类号：Q55;R378.21;S814.8

资助基金：国家自然科学基金;四川省科技计划项目;四川省科技计划项目;四川省医学科研课题;成都市技术创新研发项目

在线出版日期：2023-06-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：340-345