茶树Ankyrin基因启动子的克隆及其5'UTR内含子功能

摘要：

为了解启动子在茶树Ankyrin基因(CsAnkyrin)表达调控中的作用,以茶树新品系‘1005’嫩芽为材料,通过染色体步移技术克隆CsAnkyrin基因启动子序列,利用Neural Network Promoter Prediction和PlantCARE在线软件等对启动子序列进行生物信息学分析,将含有内含子和删除内含子的启动子序列(+intron/-intron)分别定向替换pCAMBIA1301表达载体的CaMV35S启动子,构建重组表达载体后分别转化拟南芥,并进行GUS组织化学染色分析.结果显示,克隆得到的CsAnkyrin启动子序列(命名为proAnk)为1 010 bp,含有一个5'UTR(5'Untranslated regions,5'非编码区)内含子.启动子序列除含有启动子核心元件TATA-box和CAAT-box,还存在有激素响应元件、光响应元件、厌氧胁迫应答元件以及大量功能未知或功能特异的顺式作用元件.删除5'UTR内含子后的启动子序列能够驱动下游GU报告基因表达,保留5'UTR内含子的启动子序列不能驱动下游GUS报告基因正常表达,但是RT-PCR实验结果表明5'UTR内含子在转录后没有被切除,而是和GU基因一起转录产生融合mRNA.本研究表明,proAnk具有诱导型启动子特性,5'UTR内含子对下游基因正常表达具有负调控作用,且可能是在翻译水平上对下游基因表达产生影响.

关键词：茶树、CsAnkyrin、启动子、顺式作用元件、5’UTR内含子

所属期刊栏目：25

分类号：S571.1;Q78

资助基金：福建省高等学校杰出青年科研人才培育计划

在线出版日期：2020-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1381-1387