抗DEP单克隆抗体杂交瘤细胞株的构建

摘要：

为构建针对水环境中邻苯二甲酸二乙酯(Diethyl phthalate,DEP)等邻苯二甲酸酯类(Phthalates,PAEs)化合物的免疫学快速检测方法,需获得高效稳定的分泌抗DEP单克隆抗体的杂交瘤细胞株.以邻苯二甲酸单乙酯(Monoethylphthalate,MEP)-BSA为免疫抗原免疫BALb/c小鼠,间接竞争ELISA测定小鼠血清效价,用细胞融合筛选技术筛选抗DEP单克隆抗体杂交瘤细胞株.结果显示,实验小鼠免疫血清效价最高能达到1∶5 000,经过HAT筛选、复检和亚克隆后得到9个能分泌抗DEP单克隆抗体的细胞株,细胞株上清液效价最高能达到1∶10 000,对DEP的抑制率最高能达到86.5％,且其对11种结构类似物的交叉反应率均低于0.1％,特异性较好.本研究成功构建的杂交瘤细胞株能稳定高效分泌抗DEP单克隆抗体,可为DEP的ELISA检测方法建立及胶体金免疫层析(Colloidal gold immunochromatography assay,GICA)试纸条的研制提供稳定高效的单克隆抗体源.

关键词：邻苯二甲酸二乙酯、杂交瘤细胞株、单克隆抗体、HAT筛选、胶体金免疫层析

所属期刊栏目：25

分类号：X592

资助基金：科技部海洋重大专项2016YFC1402403

在线出版日期：2019-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：578-583