酶法高效转化苯乙酮酸合成L-苯甘氨酸

摘要：

L-苯甘氨酸是合成多种抗生素和抗癌药物的重要中间体,目前主要通过化学法合成.利用蜡样芽孢杆菌来源的亮氨酸脱氢酶(LeuDH)催化苯乙酮酸的还原氨基化合成L-苯甘氨酸,并偶联甲酸脱氢酶(FDH)进行辅酶再生,建立了一种新型的苯甘氨酸生物合成方法.结果表明,该辅酶再生体系可有效地用于L-苯甘氨酸的合成,且没有副产物残留,辅底物甲酸铵还可提供还原氨基化所需NH4+,随后对酶转化条件进行优化,最适转化条件为苯乙酮酸60 g/L,甲酸铵50.4 g/L,LeuDH 4 U/mL,FDH 2 U/mL,NAD+浓度0.14 g/L,pH 8.0以及30℃.在最优条件下,1L的转化体系中,转化反应5h,苯乙酮酸转化率达到99％,L-苯甘氨酸产量60.2 g/L,ee值＞99％.本研究为三-苯甘氨酸的工业生产提供了一种更加简单、高效、经济的生物合成途径.

关键词：L-苯甘氨酸、苯乙酮酸、亮氨酸脱氢酶、甲酸脱氢酶、辅酶再生体系

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分类号：Q814.9(生物工程学(生物技术))

资助基金：江苏省杰出青年科学基金;国家自然科学基金;中国博士后科学基金;国家轻工技术与工程一流学科自主课题资助项目;中央高校基本科研业务费专项;江苏高校优势学科建设工程项目

在线出版日期：2019-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：451-456