一种提取土壤样品中麻疯树核糖体失活蛋白curcin的方法

摘要：

建立并优化了一种土壤麻疯树核糖体失活蛋白curcin的提取方法.优化后的提取步骤和参数为:0.1g含curcin的土壤样品加入1 mL的提取缓冲液(5 mmol/L磷酸盐,0.1 mmol/L EDTA,0.2％ SDS(m/V),20 mmol/Lβ-巯基乙醇,pH7.2),在18 ℃以上的室温条件下振荡混匀1h,离心取上清液.重复该过程一次,合并上清液.上清液于4℃放置过夜,离心取上清液,即为样品粗提液.该样品粗提液即可用单克隆抗体间接酶联免疫吸附法(ELISA)进一步检测其中的curcin含量.该方法对curcin含量高于8 μ.g/g土壤可进行定性检测,对于curcin含量分别为100、500、1 000μg/g的土壤样品的回收率分别达到49.3％±2.8％、64.2％±3.62％和78.33％±4.24％.该方法的变异系数保持在5％左右,对来自四川3个样地的土壤有较好的适用性.本研究建立优化的提取方法可为评估curcin蛋白在农业领域应用的生态风险提供技术支持.

关键词：土壤、核糖体失活蛋白、curcin、麻疯树、提取方法

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分类号：Q946.1;X825(植物学)

资助基金：国家自然科学基金项目31070301;国家“十二五”重大科技支撑计划课题2011BAD22B08资助 Supported by the National Natural Science Foundation of China30471378;the Key Sci-tech Project of the ”12th 5-year-plan” of China2011BAD22B08

在线出版日期：2018-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1129-1134