多酶催化拆分DL-正缬氨酸生产L-正缬氨酸
L-正缬氨酸是合成抗高血压药物培垛普利的重要中间体,其合成主要通过化学方法,具有产品纯度低、环境污染等缺点.提出一种基于多酶介导拆分DL-正缬氨酸结合不对称还原生产高纯度L-正缬氨酸的方法.首先,将混合型DL-正缬氨酸中的D型经过D-氨基酸氧化酶氧化成相应酮酸,然后利用亮氨酸脱氢酶将酮酸不对称还原生成L-正缬氨酸,同时NADH被氧化成NAD+,最后利用甲酸脱氢酶构建NADH循环再生系统.D-正缬氨酸被氧化过程中会产生副产物过氧化氢(H2O2),通过外源添加过氧化氢酶消除该副产物.基于前期最适转化温度、最适转化pH优化基础上,对过氧化氢酶添加量和单次底物添加量进行优化,利用分批补料策略提高L-正缬氨酸产量.结果显示,在最适条件下,L-正缬氨酸产量达到61.09 g/L对映体过量值(e.e.)和转化率分别为99％和96.1％.本研究合成L-正缬氨酸较之化学方法,具有环境污染少、产品纯度高等特点,为制药行业中光学纯L-正缬氨酸的生产提供了一种有效的方法.
酶促拆分、D-氨基酸氧化酶、亮氨酸脱氢酶、NADH循环再生系统、甲酸脱氢酶、L-正缬氨酸
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Q936;Q814(微生物学)
国家高技术研究发展计划863计划2015AA021004;江苏省杰出青年基金项目BK20150002;江苏省自然科学基金项目BK20161292;国家自然科学基金项目31570085;中央高校基本科研业务费专项资金JUSRP51708A资助 Supported by the High-tech Research and Development Program of China2015AA021004;the Science Fund for Distinguished Young Scholars of Jiangsu Province,ChinaBK20150002;the Natural Science Foundation of Jiangsu ProvinceBK20161292;the National Natural Science Foundation of China31570085;the Fundamental Research Funds for the Central Universities of ChinaJUSRP51708A
2018-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
1015-1021
