果胶寡糖生产菌的构建与筛选

摘要：

生物酶解法是新兴益生元果胶寡糖(Pectin oligosaccharides,POS)生产的主要途径.通过构建黑曲霉来源的多聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonase,PGA)基因pgaA表达载体pPIC9K-PGA,电转毕赤酵母GS115,筛选能够表达用于制备POS重组果胶酶的工程菌.利用SDS-PAGE检测诱导表达上清,TLC分析其水解产物成分,筛选得到一株特定降解果胶生成寡糖的酵母工程菌GS-12.该重组多聚半乳糖醛酸酶(Recombinant polygalacturonase,rePGA)相对分子量(Mr)为86×103,发酵液酶活水平24.8U/mL;GS-12经30次传代后目的基因pgaA仍能稳定遗传,水解产物成分未发生改变;酶促反应得出该酶最适温度50℃,最适pH 5.5,50℃保温5h相对酶活保持50％以上.综上,所构建酵母工程菌GS-12遗传稳定性高,耐热性提升,作用果胶可得大分子量多糖产物,对POS的工业规模化生产具有重要价值.

关键词：果胶寡糖、多聚半乳糖醛酸酶、毕赤酵母、分泌表达

所属期刊栏目：23

分类号：Q78;TQ920.1(基因工程（遗传工程）)

资助基金：四川省科技厅项目2014GZX0005、 2017TJPT0001、ARRLKF14-04;国家微生物资源平台NIMR-2016-8-1资助 Supported by the Science and Technology Department of Sichuan Province2014GZX0005,2017TJPT0001,ARRLKF14-04;the National Infrastructure of Natural Resources for Science and Technology Program of ChinaNIMR-2016-8

在线出版日期：2017-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：264-268