重组钝顶节旋藻藻蓝蛋白基因在聚球藻中的表达

摘要：

藻蓝蛋白(Phycocyanin)具有抗氧化、消炎、抗癌、增强免疫等生理活性和荧光特性.本研究从钝顶节旋藻(Arthrospira platensis)中克隆藻蓝蛋白基因,构建重组藻蓝蛋白并在聚球藻7942(Synechococcus sp.PCC 7942)中表达.利用PCR技术克隆钝顶节旋藻藻蓝蛋白α亚基(cpcA)与β亚基(cpcB)基因,在cpcA的5”端及3”端加入编码6×His标签基因,克隆HiscpcA基因,并构建同源重组表达载体pUBCA3D-1.通过自然转化法将pUBCA3D-1转入聚球藻中,经筛选鉴定获得了转基因藻株.PCR验证结果表明,目的基因整合到聚球藻基因组中的概率为86.6％.转基因聚球藻在无抗生素筛选条件下连续培养2个月,仍能稳定表达重组CpcA.以上结果表明,重组钝顶节旋藻藻蓝蛋白在聚球藻中稳定表达;研究结果为节旋藻cpcA基因改造、重组CpcA进一步分离纯化以及重组藻蓝蛋白的生产奠定了基础.

关键词：钝顶节旋藻、藻蓝蛋白、表达载体、聚球藻7942

所属期刊栏目：22

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目40976092、四川省科技厅项目2014JY0171和四川省电力科学研究院项目13H1138资助 Supported by the National Natural Science Foundation of China 40976092,the Sichuan Provincial Science and Technology Department 2014JY0171,and the Sichuan Provincial Electric Power Research Institute 13H1138

在线出版日期：2016-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：189-194