表达外源DsCOR转基因拟南芥的筛选及其抗寒性

摘要：

为验证播娘蒿抗寒基因DsCOR的抗寒功能,在实验室前期DsCOR基因大量研究的基础上,本研究通过农杆菌介导花序浸染法把诱导型表达载体PBI 121-DsCORpro681-DsCOR转入COR15a缺陷型拟南芥中(A-S),筛选获得转DsCOR基因阳性苗(A-I),并测定了A-I、A-S和野生型(A-W)拟南芥在4℃低温胁迫下的叶片脯氨酸含量、电解质渗透率和幼苗在-4℃下存活率等抗寒生理指标;使用Real-time quantitative RT-PCR检测A-I在低温胁迫下DsCOR基因的表达规律.结果显示,A-W和A-I两种植株叶片脯氨酸含量在低温处理过程中显著增加,从处理前70 μgg-1到处理后12h分别升至453 μgg-1和406 μgg-1并趋于稳定,A-S叶片脯氨酸含量变化不大(30-105 μgg-1).随着处理时间增加,A-S叶片电解质渗透率升高较明显,36 h后达到45.2％;而A-W和A-I两种植株叶片电解质渗透率最高分别达到14.3％和16.3％.幼苗存活率统计结果显示,A-S缺失COR15a后,在-4℃处理后该株系幼苗全部死亡,而A-W和A-I两个株系都有较高的存活率,分别达到53％和83％.抗寒生理指标结果表明转DsCOR基因拟南芥的抗寒能力已得到显著提高,达到野生型拟南芥水平.Real-time quantitative RT-PCR检测显示DsCOR基因在A-I中表达明显受到低温胁迫诱导.综上,DsCOR基因在COR15a缺陷型拟南芥中实现了成功表达,并显著提高了其抗寒性,最终验证了播娘蒿抗寒基因DsCOR的抗寒功能.

关键词：播娘蒿、DsCOR基因、转基因拟南芥、诱导型表达、低温胁迫

所属期刊栏目：22

分类号：Q945.78;Q78(植物学)

资助基金：国家“十二五”科技支撑计划项目2013BAD10B01、 2014BAD02B02、国家自然科学基金项目31171447和四川省科技厅项目2014GZX0005、2012GZ0008、2013HH 0007、2013GZX0161-3、2014JCPT0005资助 Supported by the Sci-tech Pillar Project of the Twelfth Five-year Plan of China 2013BAD10B01,2014BAD02B02,the National Natural Science Foundation of China 31171447,and the Science and Technology Department of Sichuan Province 2014GZX0005,2012GZ0008,2013HH 0007,2013GZX0161-3,2014JCPT0005

在线出版日期：2016-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：184-188