ncRNA伴侣分子hfq基因缺失对单核细胞增生李斯特菌环境适应能力的影响
Hfq作为一种保守的RNA分子伴侣蛋白,主要通过与ncRNA结合来参与调控单核细胞增生李斯特菌(LM)的生命活动.利用基因重叠延伸PCR (SOE-PCR)方法构建具有氯霉素抗性的pKSV7-⊿hfq重组穿梭质粒,电转化至新疆野毒株LM-SB5感受态细胞后在42℃和氯霉素压力下进行同源重组,筛选LM-SB5 hfq基因缺失株,并分析hfq基因缺失株在不同温度、pH、高盐、乙醇、H2O2、Triton X-100胁迫环境下的适应能力.结果成功构建得到一株遗传性稳定的LMhfq基因缺失株LM-⊿hfq;LM-⊿hfq对5% NaCl、3.5%乙醇、0.1% H2O2的适应能力显著降低,对30℃、37℃、42℃、pH 4、pH 9及Triton X-100的适应能力没有显著变化,表明Hf参与了LM对高盐、乙醇、H2O2胁迫环境的适应过程.本研究为进一步揭示Hfq蛋白在参与ncRNA调控细菌生命活动的机制奠定了基础.
单核细胞增生李斯特菌、非编码RNA、hfq基因、同源重组、分子伴侣
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S855.12;Q78(动物医学(兽医学))
2016-03-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1174-1178