过表达csrB和tktA强化大肠杆菌生物合成L-色氨酸
L-色氨酸代谢合成中,增加芳香族氨基酸前体物质的供应是提高产量的关键因素之一.本研究在Escherichia coli KT1306中过表达碳贮存调控中心(Carbon storage regulator,CSR)中的非编码小RNA csrB和转酮醇酶基因tktA,分别来增加芳香族氨基酸合成前体磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)及赤藓糖-4-磷酸(E4P)的供应.结果显示,2%的葡萄糖浓度下,过表达csrB及tktA单基因分别使工程菌L-色氨酸产量提高7.5%和15.6%,csrB-tktA双基因共表达使工程菌的产量提高24.7%.在低于3%的葡萄糖浓度下,重组菌株单位碳源的L-色氨酸产率均有提高,且csrB-tktA共表达的效果最佳,碳源越少,E.coliK T1306/pRSF-tac-csrB-tac-tkt产酸率优势越明显;当葡萄糖浓度为0.1%时,csrB-tktA共表达菌株的L-色氨酸产率达0.21g g-1,接近于大肠杆菌非生长状态下的最大理论产值.本研究结果表明,csrB与tktA的组合能够增加芳香族氨基酸前体物质的供应,使更多碳流流向芳香族途径,对于提升大肠杆菌生物合成L-色氨酸的生产性能有明显的促进作用.
L-色氨酸、大肠杆菌、csrB、tktA、PEP、E4P
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Q786;Q936(基因工程(遗传工程))
2015-09-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
647-651