生物发光法测定天然水体细菌数量中游离ATP的去除

摘要：

天然水体中存在浮游动植物等体细胞和游离ATP,会对细菌ATP的测定产生严重的干扰,所以探究体细胞和游离ATP的消除方法是生物发光法测定细菌总数中不可缺少的预处理步骤.本文研究了体细胞提取剂Tritonx-100的最适浓度和最适提取时间,游离ATP水解酶apyrase的最适浓度和对细菌ATP测定的影响,并将包含Tritonx-100和apyrase酶的体细胞排除体系应用于实际天然水体细菌数量的测定.结果显示,0.4％的Tritonx-100作用水样2 min能够有效提取水样中的体细胞;Apyrase酶浓度达到0.2U时能够有效水解水样中的游离ATP; Apyrase酶的加入对细菌无水解作用,对细菌ATP的测定无明显影响;包含Tritonx-100和apyrase酶的体细胞排除体系能够裂解体细胞而不会对细菌ATP的测定造成显著影响;应用于实际天然水体的结果也表明,体细胞排除体系可为ATP生物发光法准确测定环境样品中的细菌数量创造条件.本研究表明,经Tritonx-100和apyrase酶处理后,基本能够排除体细胞和游离ATP的干扰,得到天然水体中的实际细菌总数.

关键词：ATP生物发光法、Tritonx-100、apyrase、体细胞ATP、游离ATP

所属期刊栏目：20

分类号：Q93-3;X832(微生物学)

资助基金：国家自然科学基金项目31370510和上海市科委项目1352-0720600资助;Supported by the National Natural Science Foundation of China 31370510 and the Science and Technology Commission of Shanghai Municipality 13520720600

在线出版日期：2015-02-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1091-1095