青海弧菌lux基因在大肠杆菌中的异源表达

摘要：

研究淡水发光菌青海弧菌Vibrio qinghaiensis Q67的luxCDABE发光基因在大肠杆菌中的表达,并测定其对相关因素的耐受性,为其应用条件的筛选提供有利依据.对构建好的重组菌进行酶切验证筛选出发光重组菌,将其在含氯霉素的液体LB培养基中以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)为诱导剂,对发光特性的表达条件进行研究,考察重组菌生长与发光的对应关系,癸醛、pH、温度和IPTG对发光的影响,以及重组菌在室温下的稳定性测定.结果显示,重组菌发光强度随菌体生长先升后降,在对数生长后期发光强度达到最大;当癸醛浓度(0.1-3.0 μL/mL)、pH(3.0-11.0)、温度(25-43℃)和IPTG (0.05-0.35 mg/mL)从小到大变化时,重组菌的光强均呈现先增后减趋势;各影响因素分别为癸醛浓度1.0 μL/mL,pH 6.0,温度37℃,IPTG浓度0.10 mg/mL时,重组菌发光最强;发光在10min内达到最大值后迅速下降,后来平缓波动趋于稳定,3h内光强仍在测量范围内.本研究表明,青海弧菌luxCDABE基因在大肠杆菌中能很好表达并维持发光,重组菌对环境的耐受性为lux基因作为发光标记基因提供了应用范围参考.

关键词：lux基因、青海弧菌、重组菌、发光、癸醛、异源表达

所属期刊栏目：20

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目31172236资助;Supported by the National Natural Science Foundation of China 31172236

在线出版日期：2015-02-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1086-1090