以类弹性蛋白多肽为标签纯化1,3-丙二醇氧化还原酶

摘要：

以类弹性蛋白多肽(ELPs)为标签的非色谱纯化重组蛋白显示出良好的应用前景.本文使用自行设计的新型ELPs纯化标签,以低浓度盐诱发其可逆相变,从而更温和、高效地纯化融合表达的1,3-丙二醇氧化还原酶(PDOR).在测得ELPs-PDOR融合蛋白在不同浓度Na2CO3溶液中相变温度的基础上,选取0.8 mol/L Na2CO3溶液,在室温下使ELPs发生可逆相变,与目的蛋白PDOR一同聚集,经可逆相变以离心法得以纯化,得到纯度约98％的纯酶,纯化倍数可达到8倍以上,是组氨酸标签的7倍多.融合酶的酶学性质表明ELPs作为纯化标签对目标蛋白空间结构影响微小,融合蛋白可直接作为酶催化化学反应.低盐诱发相变的方法,可避免盐浓度过高对酶结构及性能产生的不利影响,因此,在重组酶纯化上更具有优势.

关键词：类弹性蛋白多肽、纯化标签、可逆相变、重组酶纯化、非色谱法

所属期刊栏目：19

分类号：Q814(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金项目20806031;福建省高校新世纪优秀人才支持项目07176C02资助 Supported by the National Natural Science Foundation of China20806031;the Program for New Century Excellent Talents in Universities of Fujian07176C02

在线出版日期：2013-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：709-712