用改进的TRAP法测定树木端粒酶活性
TRAP法是一种常用的测定端粒酶活性的方法,但并不太适合测定木本植物的端粒酶活性因此以油松针叶为实验材料,对TRAP法进行改进.参照前人的研究通过对比实验证明,在端粒酶提取过程中将PEG8000加入上清液,可获得高效的端粒酶.在此基础上,对PCR先导引选择TS、模板浓度选择100 ng,最终获得油松针叶高质量的端粒酶PCR产物.应用SYBR Green Ⅰ替代银染液对电泳凝胶进行染色,获得条带清晰、重复性好的电泳结果.通过对油松针叶、银杏叶片、胡杨愈伤组织、沙冬青悬浮细胞等4种木本植物实验材料进行测定,证明该改进的技术体系可能是适合于术本植物端粒酶活性测定的稳定的、灵敏度高的可行方法.
树木、端粒酶活性、TRAP、SYBR Green Ⅰ染色
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Q946(植物学)
北京市教委共建项目;北京市公园管理中心项目;北京市自然科学基金
2012-12-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
682-686