盐藻LHCB3蛋白的表达纯化及抗体制备

摘要：

为了解盐生杜氏藻(Dunaliella salina)主要光捕获蛋白LHCB蛋白的功能,将已获得的盐藻Lhcb3基因构建到原核表达载体pET32a-DsLhcb3,通过优化表达条件,建立了高效的重组系统.pET32a-DsLhcb3在大肠杆菌中的优化表达条件为1 mmol/L IPTG在37℃下诱导4h.采用镍离子亲合层析纯化获得LHCB3蛋白,并以此为抗原制备了多克隆抗体,经琼脂糖扩散检测效价,在1∶16处有明显沉淀.提取盐藻总蛋白,经过制备的LHCB3抗体杂交,在29 000处获得两条明显的杂交条带,为进一步研究盐藻LHCⅡ蛋白表达机理奠定了基础.

关键词：盐生杜氏藻、光系统Ⅱ、光捕获蛋白、表达纯化、抗体

所属期刊栏目：17

分类号：Q949.210.6;Q78(植物学)

资助基金：国家自然科学基金;国家科技支撑计划

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：847-850