重组大肠杆菌产CotA漆酶的发酵条件优化
CotA漆酶在环境保护、食品工业和纸浆漂白等工业中具有重要的应用价值.将重组表达载体pET-22b/CotA转 入大肠杆菌BL21 (DE3),得到工程菌株,采用单因素实验和正交实验相结合的方法,研究诱导表达条件和发酵培养基对重组大肠杆菌产CotA漆酶量的影响.结果表明,初始pH 7.5的培养基中,添加0.6 mmol L-1 Cu2+,1 gL-1葡萄糖作碳源、15 g L-1蛋白胨和2gL-1硫酸铵作氮源,以10%的接种量,37℃、200 r/min,直到菌液的D600nm值为1.0,加入终浓度为1.0 mmol L-1的IPTG,25 °C诱导12h,漆酶的产量最高.优化前发酵液的粗提液的漆酶活性仅为1 190 U mL-l,优化后达到3 526 U mL-1,正交实验优化后漆酶活性提高了2.96倍.纯化的CotA漆酶最适反应温度为45℃,最适pH值为7.2.CotA漆酶对RBBR的脱色率在90%以上,此CotA漆酶在短时间内对染料能够有效地脱色,能够成为有潜力的工业用酶.
CotA漆酶、大肠杆菌、重组工程菌、发酵条件优化
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TQ925;Q784(其他化学工业)
2009年东北林业大学研究世科技创新项目;世界自然基金项目WWF;CN0078.01;国家自然科学基金项目30170775;30671702
2011-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
563-567
