转座子挽救法克隆鞘氨醇单胞菌CDS-1中呋喃丹水解酶相关基因

摘要：

用含Tn5转座子的自杀性质粒pSC123诱变呋喃丹降解菌Sphingomonas agrestis CDS-1,获得失去呋喃丹降解功能的突变株CDS-M1.以pMD18-T为载体在E.coli DH5α中构建了CDS-M1的基因组文库,采用转座子挽救法对Tn5插入位点两侧翼的序列进行克隆与测序,根据测序结果(共4 551个碱基)设计引物,从CDS-1的基因组中扩增到同样大小的片段,把该片断克隆到广宿主载体pPZP201上,得到重组质粒pCDZ1,通过三亲接合的方法把pCDZ1导入CDS-M1中进行功能互补实验,结果显示CDS-M1的呋喃丹水解功能得到了恢复,表明该片断中包含呋喃丹水解酶相关基因.图7表1参14

关键词：Sphingomon asagrestis CDS-1、呋喃丹、转座子挽救法、基因克隆

所属期刊栏目：15

分类号：X172;Q78(环境生物学)

资助基金：国家自然科学基金项目30400013

在线出版日期：2009-12-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：677-681