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10.3724/SP.J.1145.2009.00059

扩展细胞色素P450 2A6对大位阻底物的适应性

引用
细胞色素P450酶(P450)的分子改造及其催化的生物转化是当前的两个研究热点.本研究以扩展P450 2A6的底物适应性为目标,通过尝试对P450 2A6酶进行N-端修饰提高表达量、筛选随机突变库以及点突变改变活性位点重要氨基酸残基等手段,在两个随机突变体中未筛选到功能突变体,但通过点突变重要氨基酸残基获得了新的突变体P450 2A6 (N297Q/I300A).该突变体具有比野生型和已报道的其它突变体更广泛的底物适应性,能够催化氧化大位阻底物6-苄氧基吲哚(6-OBzl-indole)生成蓝绿色物质.该物质经质谱测定为靛蓝类二聚体化合物.实验表明,其中两个氨基酸残基的变化都是关键突变,此结果与最新的P450 2A6突变体晶体结构研究相符.计算机模拟显示,I300A突变导致活性口袋在铁卟啉环的垂直和水平方向都增大,使其能接纳在两个方向都有位阻的底物;而297位的天冬酰胺是一个功能保守的残基,N297Q的变化可能与氢键等弱作用有关.图4表1参29

细胞色素P450 2A6、CYP2A6、点突变、生物转化、6-苄氧基吲哚

15

Q73;Q939.93(生物膜的结构和功能)

中国科学院百人计划经费和四川省青年科技基金08ZQ026-023

2009-05-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共5页

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应用与环境生物学报

1006-687X

51-1482/Q

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2009,15(1)

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