枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)过氧化氢酶的分离纯化及性质

摘要：

对产自枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis WSHDZ-01的过氧化氢酶,通过乙醇沉淀、DEAE阴离子交换层析、疏水层析3步纯化,最终获得电泳纯的目标酶(纯化6.8倍).该过氧化氢酶的亚基相对分子质量(M1)为63×103,在405 nm处显示特征吸收峰,推测含有血红素.计算获得酶的表观米氏常数为26.87 mmol L-1.该过氧化氢酶不受低亚硫酸钠的还原作用影响,但被氰化物、叠氮化物和3-氨基-1,2,4-三唑(单功能过氧化氢酶的专一抑制剂)强烈抑制.以邻苯二胺作为电子供体测定酶活时,该酶不显示过氧化物酶活性,因此本文将纯化的过氧化氢酶定性为单功能过氧化氢酶.此外,该酶具有热敏感的特点,且酶活在pH 5～10范围内不受pH影响,此后,活性随着pH的升高而升高,并在pH 11～12处有明显的酶活高峰,在pH 11、25℃放置60 min酶活基本不变,表明该酶在高碱条件下具有很高的活力和一定的稳定性.

关键词：枯草芽胞杆菌、过氧化氢酶、纯化、性质

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分类号：TQ925.9;Q939.106(其他化学工业)

资助基金：国家重点基础研究发展规划项日"973"计划,No.2007CB714036.教育部新世纪优秀人才支持计划和浙江省重点科研工业项目No.2006C21117资助 Supported by the State Key Basic R & D Program of China"973"Program 2007CB714036;the New Century Excellent Talent Supporting Project of the Ministry of Education and the Key Science Research Industry Project of Zhejiang.China2006C21117

在线出版日期：2009-03-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：820-824